Kidney Int ：肾小管生物钟调节功能障碍致使糖尿病患者肾糖异生增强和加重高血糖

背景及目的：在心胭脂管疾病病人中都，脾脏通过增加原粪中都的重吸收和上调胫骨小管中都的糖异生来促进心胭脂管疾病高胭脂糖的时有发生。然而，胭脂糖水平的慢性升高确实反过来引发心胭脂管疾病脾病(DN)，这是心胭脂管疾病最严重的并发症之一，其特征是脾小球、钾离子和脾脏毛细胭脂管受损。虽然葡萄糖应激是心胭脂管疾病脾病时有发生和演进的主要因素，但在大多数心胭脂管疾病病人中都，高胭脂糖本身并不会引发脾新功能不全。这确实，合并症或生态系统、遗传或表观遗传的变化确实是启动和/或减慢困难重重DN所必需的。做梦是一种普遍存在的分子结构计时器的系统，它将巨噬细胞、组织和系统的生物新功能与24小时的生态系统时间尺度联动。均匀分布做梦驱动巨噬细胞并不一定和组织特有的节律，它们的嗜睡与一系列疾病的发病和/或困难重重有关。然而，心胭脂管疾病病人脾脏中都内在做梦的组织学生理作用仍不清楚。

方法律条文：为了解决这个难题，我们用链脲仓菌素诱导了膝巨噬细胞(cKOp激素)或钾离子(cKOt激素)中都缺乏昼夜节律转录调节系数BMAL1的激素患I型心胭脂管疾病。

激素模型制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1激素(cKOp激素)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1激素(cKOt激素)经DOX(的水中都2 mg/ml)执行2时更，Bmal1(ARNTL)基因序列失活。他们的准确率(Bmal1lox/lox激素)不能接受完全相同的DOX化疗。在DOX化疗中止一时更，通过腹腔注射链脲仓菌素(STZ，50 mg/kg体重，每日5天)诱导I型心胭脂管疾病。溶媒执行的激素不能接受PBS的溶媒注射。所有科学实验均在最后一次注射STZ或溶媒8时更展开。在所有科学实验中都，从ZT9杀的激素身上采集组织和胭脂液(ZT-Zeitgeber时间单位；ZT0是光临时间，ZT12是关灯时间)。

葡萄糖膨大：激素被家养在个体葡萄糖膨大子中都(Tecniplast，意大利)。在4天的适应期后展开24小时的唾液收集。

胭脂浆和唾液生化量度：用Vaudois中都心医院临床科学实验室(LCC)量度粪和胭脂浆Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、钙和硝酸盐浓度及渗透压。用酸碱仪(Metrohm)量度唾液pH系数。可用EPOC胭脂液统计分析仪(摩托罗拉保健)测算动-静脉混合胭脂的胭脂液pH系数和胭脂气。粪铵量度采用Berthelot法律条文。粪可氢氧化钠酸量度采用Chan25方法律条文。采用放射免疫法律条文(DPC)量度胭脂浆儿茶酚胺水平。用Mercodia该公司的试剂盒量度胭脂浆皮质醇。

耐量试验(GTT)：洗手15小时后，给空白准确率和cKOt激素腹腔注射(1g/kg体重)。分别于注射年前(t=0)、注射后15、30、60、90、120、180min，用胭脂糖读数仪量度胭脂糖。

皮质醇耐量试验(ITT)：洗手4h后，给准确率和cKOt激素腹腔注射0.5U/kg体重的重新分配人皮质醇(人重新分配皮质醇，Sigma)。分别于皮质醇注射年前(t=0)、皮质醇注射后15、30、45、60、90、120、150、180min量度胭脂糖。如果胭脂糖降至2 mm以下，则通过腹腔注射30毫克拯救激素，并将其排除在统计分析之外。

RNA测序技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus中都的描绘展开。可用GRCm38.92基因序列注释。可用TMM归一化对基因序列计数展开定标，并可用LIMMA R纸制27中都的“CPM”变量将其对数转换为每百万计数(CPM)。计算出来了KO和Ctrl动物在未执行(PBS)和执行(STZ)条件下的相异理解以及两者之间的电磁场。对于这三种比较中都的每一种，选择FDR

结果：在精神病心胭脂管疾病的cKOp和cKOt激素中都，做梦新功能障碍与心胭脂管疾病脾病的时有发生没有相关性。然而，与链脲仓菌素化疗的准确率相比较，精神病心胭脂管疾病的cKOt激素展现出出加高胭脂糖很重，粪中都排出增加，多粪增加，脾脏肥大更明显。mRNA和蛋白质理解统计分析显示，与心胭脂管疾病准确率激素相比较，cKOt心胭脂管疾病激素脾脏中都的糖异生途径特别是在增强。CKOt心胭脂管疾病激素的转录统计分析和新功能统计分析已确定了直接或间接阻碍糖异生途径的多种的系统的变化。

结论：我们展示出内在钾离子做梦新功能障碍可通过增强脾胫骨小管的糖异生而很重心胭脂管疾病高胭脂糖，实质性强调了做梦调节在心胭脂管疾病病人中都的重要性。

标题出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24